本文是学习GB-T 18261-2013 防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的试验方法. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们
本标准规定了防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的实验室及户外试验方法。
本标准适用于实验室条件下确定防霉剂对木材霉菌及变色菌的毒性极限及户外试验评估防霉剂防
治木材霉菌及变色菌的效果。木制品、人造板、竹材及藤类的防霉和防变色试验亦可参照使用。
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GB/T 14019—2009 木材防腐术语
GB/T 14019—2009界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
3.1
木材霉菌 wood mould fungi
霉菌是丝状真菌的统称,木(竹、藤)材及其制品上长出的肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落,
即是木材霉菌。
3.2
木材变色菌 wood stain fungi
侵染新采伐的原木、湿锯材、木(竹、藤)材及其制品,菌株有色菌丝、孢子和色素聚集引起上述材料
发生蓝色、红色、褐色或黑色等颜色变化的丝状真菌。
3.3
毒性极限浓度 toxic limits concentration
防霉剂有效抑制霉菌和变色菌侵染木(竹、藤)材及其制品的最低浓度。
4.1.1 高压蒸汽灭菌器:压力0.25 MPa, 温度138℃。
4.1.2 超净工作台,或无菌箱、接种室等。
4.1.4 电热恒温培养箱,或培菌室、恒温恒湿培养箱等。
4.1.5 天平,精确度0.001 g。
4.1.6 移液器1000μL。
GB/T 18261—2013
4.2.1.1 木材树种选择
针叶材选用马尾松(Pinus massoniana Lamb.)、辐射松(P.radiate
D.Don)或樟子松(P.sylvestris
var.mongolica Litv.)等,阔叶材选用橡胶木(Hevea
brasiliensis(H.B.K.)Muell.-Arg.)或毛白杨
(Populus tomentosa Carr.)等树种。
4.2.1.2 竹材种类选择
竹材选用3年~5年生毛竹(Phyllostachys heterocycla var.pubescens)。
4.2.2.1 木材试样
取4.2.1.1树种中的一种的2株~3株树,胸径200 mm~300
mm,每株树在胸高部位向上截取长
1.2m
试材一段。试样从截取试材的边材中制取,要求无虫蛀、无变色、无霉斑。不需干燥,湿材刨光,
制成试样。尺寸为50 mm (顺纹长)×20 mm×5mm。
试样做好后迅速进行4.4.2规定的操作。如暂
时不用,应装入塑料保鲜袋内放在冰箱中0℃以下保存,防止真菌感染,待使用时取出解冻后再进行药
剂处理。
4.2.2.2 竹材试样
竹材从地面基部1.3 m 以 上 截 取 1 m
作试材。需刨去竹青和竹黄,以竹肉层作试样。尺寸为
50 mm(顺纹长)×20 mm×5mm, 逐一称重,编号,备用。
4.3.1.1 可可球二孢(Botryodiplodia theobromae
Pat.)
4.3.1.2 串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme Sheldon
4.3.1.3 链格孢霉(Alternaria
alternate(Fries)Keissl),异名细交链格孢(A.tenuis Nees)
4.3.2.1 黑曲霉(Aspergillus niger V.Tiegh
4.3.2.2 桔青霉(Penicillam citrinum Thom
4.3.2.3 绿色木霉(Trichoderma viride Pers.ex Fr.
4.3.3.1 允许选择同属不同种的霉菌或变色菌菌株。
4.3.3.2 一般新的防霉剂需要测试对4.3.
1和4.3.2规定的6种单菌株(3种霉菌,3种变色菌)和其
他可选择菌的混合接种体的毒性。
GB/T 18261—2013
水载型防霉剂用普通自来水稀释,有机溶剂型防霉剂用合适的溶剂溶解和稀释。药液有效成分浓
度以质量分数表示,使用前搅拌均匀。
一种药剂至少设5个梯度浓度,其中2个浓度低于极限浓度(如
需要可先做预备试验,以便估计极限浓度的大致范围)。除试验的防霉剂外,通常还应选择其他防霉效
果较好的防霉剂作对比试验,设3~5个梯度浓度,其中1~2个梯度浓度和试验药剂的浓度相同。
每种浓度按每种试菌、每种试材至少处理6块试样。另外6块~10块试样未经任何处理以确定所
用试菌的活性及用于计算防霉剂防治效力。处理前先逐块编号,测量长(L) 、宽
(W) 和厚(H), 准确至 0.01mm; 称重(m₁), 准确至0.001 g
。采用冷浸法处理,将同一组的试样侧立放在烧杯中,井字形堆
放,最下面一层侧立同尺寸非本试验用试样,重物压顶,防止浮动,倒入药液,液面高出试样顶面1
cm~
2 cm(图1)。浸渍3 min
后倒出药液,烧杯口密封上一层塑料膜以防干燥,静置过夜。接种前取出放在
培养皿中,称重(m₂), 准确至0.001 g, 计算吸药量。吸药量按式(1)计算。
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式中:
R — 吸药量,单位为克每平方米(g/m²);
m₂—— 浸渍后质量,单位为克(g);
m₁—— 浸渍前质量,单位为克(g);
c ——药液浓度(质量分数),%;
H—— 试样厚度,单位为毫米(mm);
L —— 试样长度,单位为毫米(mm);
W— 试样宽度,单位为毫米(mm)。
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非测试试样
图 1 试样防霉剂处理图
洗净去皮马铃薯200 g,切成小块,加水适量煮沸30 min
后过滤,在过滤液中加入葡萄糖20 g、琼脂
GB/T 18261—2013
20 g~25g,加水定容至1000 mL, 再加热,待琼脂溶化后分装在3个500 mL
细口三角瓶内,瓶口加棉 花塞并包防水纸,置于蒸汽灭菌器中,压力0.1 MPa,
温度121℃,灭菌30 min。 灭菌后的培养基先放
于无菌室或超净台上冷却至不烫手时,倒入已灭菌的培养皿(直径10 cm)
中,每个培养皿15 mL~
在无菌条件下,将供试菌接种在平板培养基上,每一种试菌不少于3个培养皿。置于培养箱中保持
25℃~28℃,相对湿度85%,培养1周,即可用于配制孢子与菌丝体的悬浮液。
4.5.3.1
霉菌与变色菌单菌种菌丝体与孢子悬浮液的配制
在无菌条件下用接种针挑取供试菌株的菌丝体及孢子,挑取时应沿菌落的前缘向内连培养基一起
切割,放入已灭菌的组织研磨器内,加适量无菌水,适当磨碎后倒入已灭菌的有玻璃珠的三角瓶内,加少
量无菌水,放在摇床上(转速为100r/min~120r/min) 振荡,转10 min~15
min制成悬浮液供接种用。
4.5.3.2 混合霉菌孢子悬浮液配制
4.5.3.1 配制的3种霉菌的孢子悬浮液分别逐级稀释,使每菌最后的悬浮液孢子数为(1~2
10⁶个/ mL。
然后3种霉菌孢子液等体积混合获得最终的混合孢子悬浮液进行试验。
在超净台上用移液器吸取菌丝体与孢子悬浮液或混合孢子悬浮液,注入已有平板培养基的培养皿
内(每个培养皿内0.2 mL~0.5mL)
摇动,使之在培养基表面均匀分布。接种后立即放入恒温恒湿培
养箱内培养(保持25℃~28℃,相对湿度85%),培养7天至菌落成熟,供试样接菌用。
试样接菌前,同一组试样用多层纱布包好,以100℃蒸汽灭菌30
min,待冷却后接菌。在无菌条件
下,在已长满菌丝体的平板培养基上面,先放2根已灭菌的玻璃棒(直径3 mm),
平行排列,再将试样横
放在玻璃棒上面,每个培养皿内放2块试样(图2)。接菌后立即放回培养箱内(保持25℃~28℃,相对
湿度85%),培养4周。
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图 2 试样接种摆放图
GB/T 18261—2013
试样接菌培养4周后,目测试菌感染面积。试样受霉菌和变色菌表面感染值分级见表1。感染值
越低,药效越大。
如果对照试样表面感染值未到4,则说明实验不准确,实验无效,需重新进行试验。
表 1 试样受霉菌和变色菌表面感染值分级
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防治效力按式(2)计算。
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…………………………
(2)
式中:
E — 防治效力,%;
D₁—— 药剂处理试样的平均感染值;
Do—— 未处理对照试样的平均感染值。
对霉菌的防治效力,以对3种霉菌和混合霉菌的防治效力的算术平均数表示。对变色菌的防治效
力,以对3种变色菌防治效力的算术平均数表示。
接变色菌的试样,除记录表面感染程度外,还需要刷掉表面菌丝,目测表面变色程度,并在试样厚度
中线,沿顺纹方向劈开,检查试样内部变色程度。试样变色程度按表2分级。防霉剂对试样变色菌防治
效力分析同时参考试样受变色菌侵染后变色程度分级数据。
表 2 试样受变色菌侵染后变色分级
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GB/T 18261—2013
某种药剂处理的试样,接种某种试验菌,培养4周后其平均感染值在0~1之间的药液浓度,可视为
该药剂对此试验菌的毒性极限浓度。
选温暖潮湿的季节进行,有利于霉菌及变色菌的繁殖。
试材选取和试件制备参照4.2.1和4.2.2进行,试件尺寸按照加工用材需要选定。
从极限浓度开始,向高浓度设3个梯度,另设一组药剂未处理对照材。每组20块试件。
一般采用 常温浸渍法处理,药液吸收量应至少达到200 g/m²~250
g/m²,浸渍时间依试件厚度及含水率变化而
定。试件浸渍之前,先逐块编号、测量表面积和体积,浸渍后再称重。吸药量按式(1)计算。
试件经药剂处理后,按常规气干方法堆垛。垫条不需药剂处理。不同药剂和不同浓度处理的试件
可放在同一个材堆中。顶上3层放未经药剂处理的试件作保护层,材堆上盖塑料布防雨。试件在自然
条件下感染霉菌及变色菌。
每隔2周拆垛检查一次,检查后照原位置放好。至少连续检查4次。检查每根试件表面是否有霉
菌或变色菌感染,若已感染,选感染最严重的1 m 长的材面(不足1 m
时以全长计),目测感染面积百分
比。最后2次检查时还要检查试件内部是否变色,离端头20 cm 处锯断,
一次检查一个端头,目测断面 变色面积百分比。
药剂未处理材平均感染值达到4级时可结束试验。
凡表面无明显霉斑、变色,感染面积小于5%,且内部材色正常或只有轻微变色,变色面积小于5%,
可认为防霉防变色合格。防治效果以合格试件数占试件总数的百分比表示。
试验报告应包括下列内容:
a) 试验依据的标准;
b) 试验单位、试验人;
c) 试验日期;
d) 防霉剂名称、剂型、有效成分及含量,生产厂家及生产日期;
e) 试材树种、产地、树龄、天然耐久性(包括抗变色及抗霉性能);
f)
户外试验地点、日期,试验期间的平均大气温度、平均相对湿度和平均降水量;
g) 试验结果报告表(见附录 A 和附录B)。
GB/T 18261—2013
(资料性附录)
防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的实验室结果报告表
表 A.1 防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的实验室结果报告表
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GB/T 18261—2013
(资料性附录)
防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的户外试验结果报告表
表 B.1
防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的户外试验结果报告表
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防霉剂对木材霉菌及变色菌
防治效力的试验方法
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010-68522006
2014年1月第一版
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